分子生物学-基因工程试题集.pdf

分子生物学 单项选择题 1.质粒pBR322是( ) A.经人工改造的大肠杆菌质粒 B.天然的酵母质粒 C.天然的大肠杆菌质粒 D.经人工改造的噬茵体 E.经人工改造的酵母质粒 参考答案：A 【解析】 2.蛋白质在电场中移动的方向取决于( ) A.二级结构 B.三级结构 C.空间结构 D.侧链的游离基团 E.净电荷 参考答案：E 【解析】考点，电泳。当溶液的pH≠pI时蛋白质带电荷，在电场中向电性相反的方向移动。pH＜pI，蛋 白质净电荷为正，向负极泳动；pH＞pI，净电荷为负，向正极泳动。 3.可以利用逆转录酶作为工具酶的是( ) A.质粒的构建 B.细胞的转染 C.重组体的筛选 D.目的基因的合成 E.蛋白质印迹 参考答案：D 【解析】 4.下列不属于基因工程的常用酶的是( ) A.限制性核酸内切酶 B.逆转录酶 C.DNA连接酶 D.末端脱氧核苷酸转移酶 E.DNA解链酶 参考答案：E 【解析】 5.下列不能获得目的基因的方法是( ) A.物理方法 B.化学合成法 C.cDNA文库 D.基因组DNA文库 E.PCR法 1 【解析】 6.基因组DNA文库是( ) A.一个转化子细胞包含所有染色体片段 B.题个转化子细胞包含所有cDNA片段 C.携带各种基因组DNA片段的所有转化子细胞的集合 D.携带各种cDNA片段的所有转化子细胞的集合 E.一个转化子细胞包含所有基因组DNA 参考答案：C 【解析】考点，基因组DNA文库。基因组DNA文库包含一个生物的全部基因组DNA信息。 7.下列符合Ⅱ类限制性核酸内切酶特点的是( ) A.识别的序列呈回文结构 B.没有特异酶解位点 C.同时有连接酶活性 D.可切割细菌体内自身DNA E.同时有聚合酶活性 参考答案：A 【解析】考点，限制性核酸内切酶的特点。限制性核酸内切酶是识别DNA特异序列，并在识别位点或其周 围切割双链DNA的一类内切酶。限制性核酸内切酶主要来源于细菌，在细菌体内限制外源DNA、保护自身DNA。 Ⅱ型限制性核酸内切酶识别位点通常是回文结构。 8.用同一种限制性核酸内切酶切割载体和目的基因后进行连接，连接产物含大量自身环化载体，采用下列哪 种酶处理，可防止载体自身环化( ) A.核酸内切酶 B.核苷酸激酶 C.核酸外切酶 D.末端转移酶 E.碱性磷酸酶 参考答案：E 【解析】 9.发生在同源序列间的重组称为( ) A.人工重组 B.随机重组 C.位点特异的重组 D.同源重组 E.转座重组 参考答案：D 【解析】考点，同源重组的概念。同源重组是指发生在同源序列间的重组，通过链的断裂和再连接，在 2个DNA分子同源序列间进行单链或双链片段的交换。 10.下列哪种酶作用时需要引物( ) A.限制性核酸内切酶 B.末端转移酶 C.逆转录酶 2 D.DNA连接酶 E.解链酶 参考答案：C 【解析】 11.在原核生物表达实验中，载体可不具备( ) A.适当的启动子 B.3′端的加尾信号 C.适宜的筛选标志 D.可选择的多克隆位点 E.核糖体结合位点 参考答案：B 【解析】 12.下列不是真核表达载体所独有的元件是( ) A.真核生物启动子 B.多克隆位点 C.加尾信号 D.真核生物增强子 E.真核转录终止信号 参考答案：B 【解析】 13.Western blotting是指将( ) A.将DNA转移到膜上，用DNA探针杂交，检测样品中DNA水平 B.将蛋白质转移到膜上，用抗体做探针杂交，检测蛋白质表达水平 C.将RNA转移到膜上，用DNA探针杂交，检测样品中DNA水平 D.将DNA转移到膜上，用RNA探针杂交，检测样品中RNA水平 E.将RNA转移到膜上，用RNA探针杂交，检测样品中RNA水平 参考答案：B 【解析】考点，Western blotting。West-ern blotting是通过抗原一抗体反应检测蛋白质的含量。 14.将重组DNA导入大肠杆菌茵体的方式是( ) A.转化 B.转导 C.转染 D.转录 E.转换 参考答案：A 【解析】 15.最常用作转基因和基因敲除动物模型的生物是( ) A.大鼠 B.小鼠 C.果蝇 D.线虫 3 E.家兔 参考答案：B 【解析】考点，利用基因修饰动物研究基因功能。通过在实验动物，特别是小鼠体内进行相关的基因操 作，获得基因修饰动物品系，已成为在体研究基因功能的重要手段，常用的有转基因动物和基因敲除动物 ，小鼠最常用。 16.能识别DNA特异序列并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类酶是( ) A.核酸外切酶 B.核酸内切酶 C.限制性核酸外切酶 D.限制性核酸内切酶 E.核酸末端转移酶 参考答案：D 【解析】 17.PCR技术不能用于( ) A.目的基因的克隆 B.获得突变基因 C.DNA的定量分析 D.DNA序列测定 E.蛋白质含量测定 参考答案：E 【解析】考点，PCR。PCR技术可以是在体外特异性扩增已知基因，通过对引物的改造还可以引入突变等 。PCR是在DNA水平上的操作，不能用于检测蛋白含量。 18.在重组体中切出插入片段，最常用的方法是( ) A.用多种限制性核酸内切酶将其切出 B.用DNA酶将其切出 C.用SI核酸酶将其切出 D.用重组时所用的限制性核酸内切酶将其切出 E.用任意2种限制性核酸内切酶将其切出 参考答案：D 【解析】 19.Sourthern blotting指的是( ) A.将DNA转移到膜上，用DNA做探针杂交 B.将RNA转移到膜上，用DNA做探针杂交 C.将DNA转移到膜上，用蛋白质做探针杂交 D.将RNA转移到膜上，用RNA做探针杂交 E.将DNA转移到膜上，用RNA做探针杂交 参考答案：A 【解析】考点，印记技术分类及应用。印迹技术包括DNA印迹技术(Southern blotting)、RNA印迹技术 (Northern blotting)、蛋白质印迹技术(Western blotting)，其中Western blotting研究对象为蛋白质。 Sourth-ern blotting研究对象为DNA。 20.可以用于鉴定转基因动物体基因组内是否整合了外源基因的方法是( ) 4 A.Southern blotting B.NoIthern blotting C.Western blotting D.RT-PCR E.核型分析 参考答案：A 【解析】考点，分子杂交。Southern blotting可以用DNA探针检测基因，设计外源基因探针即可用于鉴 定。 21.下列蛋白质通过凝胶过滤层析时，最后一个被洗脱下来的是( ) A.马肝过氧化氢酶(相对分子质量247500) B.肌红蛋白(相对分子质量16900) C.人血清清蛋白(相对分子质量68500) D.牛β-乳球蛋白(相对分子质量35000) E.胰岛素(相对分子质量5733) 参考答案：E 【解析】考点，凝胶过滤层析。凝胶过滤层析是根据分子体积的大小分离的手段，与分子是否带电荷或 被吸附关系不大。层析柱内填满带有小孔的颗粒，蛋白质溶液加于柱之顶部，任其往下渗漏，小分子蛋白质 进入孔内，因而在柱中滞留时间较长，大分子蛋白质不能进入孔内而径直流出，因此不同大小的蛋白质得以 分离。分子大的蛋白质先被洗脱下来。马肝过氧化氢酶(相对分子质量247500)分子量最大，体积最大，所以 最先被洗脱。胰岛素(相对分子质量5733)分子量最小，体积最小，所以最后被洗脱。 22.在基因工程中，将目的基因与载体DNA拼接的酶是( ) A.DNA聚合酶I B.DNA聚合酶Ⅲ C.限制性核酸内切酶 D.DNA连接酶 E.逆转录酶 参考答案：D 【解析】考点，基因工程常用的工具酶。在基因工程中，构建重组DNA分子时，必须在DNA连接酶作用下 ，才能使目的基因与载体DNA共价相连。DNA聚合酶Ⅰ、逆转录酶、限制性核酸内切酶(RE)等不参与拼接过程 。基因工程中不需要DNA聚合酶Ⅲ。 23.重组DNA技术的操作主要是在什么水平上进行重组( ) A.细胞 B.细胞器 C.分子 D.原子 E.以上都不对 参考答案：C 【解析】 24.可以用于原位鉴定基因、表达产物及定位分析的杂交技术是( ) A.Southern blotting B.Northern blotting C.Western blotting 5 D.FISH E.ChIP 参考答案：D 【解析】考点，杂交。可用于基因及表达产物定位分析的是FISH，即荧光原位杂交法(Fluorescence in situ hybridiza-tion)。 25.目前基因治疗主要采用的方法是( ) A.对患者缺陷基因进行重组 B.提高患者的DNA合成能力 C.调整患者DNA修复的酶类 D.将表达目的基因的细胞输入患者体内 E.对患者缺陷基因进行替换 参考答案：D 【解析】考点，基因治疗的临床应用现状。因为单基因遗传病的致病基因清楚，所以目前其基因治疗方 案也相对成熟。 26.下列不是目前使用的研究转录组的主要方法的是( ) A.基因芯片 B.SAGE C.MPSS D.Western blotting E.微阵列 参考答案：D 【解析】 27.EST序列本质上是( ) A.基因组DNA B.cDNA序列 C.mRNA序列 D.多肽序列 E.蛋白质序列 参考答案：B 【解析】 28.以醋酸纤维素薄膜为支持物，使用pH8.6的巴比妥缓冲液，血清蛋白质电荷状态是( ) A. B.清蛋白带负电荷，球蛋白带正电荷 C.清蛋白和球蛋白都带负电荷 D. E.清蛋白和球蛋白都带正电荷 参考答案：C 【解析】 6 29.用于测序的DNA末端终止法中不需要( ) A.4种脱氧核苷酸(dNTP) B.4种双脱氧核苷酸(ddNTP) C.DNA聚合酶 D. E.DNA连接酶 参考答案：E 【解析】考点，Sanger双脱氧法测序。利用DNA合成过程中加入荧光标记的ddNTP，使DNA链合成终止。 30.mRNA-DD实验中分离PCR扩增产物使用的方法是( ) A.PAGE B.SDS-PAGE C.琼脂糖凝胶电泳 D.亲和层析 E.RT-PCR 参考答案：A 【解析】考点，mRNA-DD的原理。mRNA-DD用PCR的方法扩增正常人和患者的相应组织cDNA，用聚丙烯酰胺 凝胶电泳(PAGE)分离扩增产物，比较两组间产物的差异。 31.基因诊断不可能实现的是( ) A.对某种遗传疾病发生的预知 B.改变基因的原有表达方式 C.对个体身份的认定 D.对病毒的亚型准确判断 E.判定某种疾病的易感性 参考答案：B 【解析】考点，基因诊断的定义。基因诊断是对基因结构及表达的检测分析手段，不改变基因的表达方 式。 32.限制性片段长度多态性(RFLP)是由于( ) A.碱基改变发生在内含子上 B.碱基改变发生在外显子上 C.碱基改变发生在增强子上 D.碱基改变发生在微卫星上 E.碱基改变发生在酶切位点上 参考答案：E 【解析】考点，RFLP的原理。RFLP是利用特定的限制性核酸内切酶切割基因组DNA，所产生的DNA数目和 各个片段的长度反映了DNA分子上不同酶切位点的分布情况。 使其表达产物补偿缺陷基因的功能或加强原有功能的基因治疗方法是( ) 7 A.基因置换 B.基因失活 C.基因增补 D.基因矫正 E.基因沉默 参考答案：C 【解析】考点，基因增补的定义。又称基因添加，指不删除突变的致病基因，而在基因组的某一位点额 外插入正常基因，在体内表达出功能正常的蛋白质，达到治疗疾病的目的。 34.通常用于高通量研究细胞在RNA水平整体基因表达谱改变的技术是( ) A.蛋白质芯片 B.RT-PCR C.cDNA芯片 D.ChIP on chip E.Northern blotting 参考答案：C 【解析】考点，RT-PCR和Northern blotting是经典的在RNA水平研究基因表达改变的方法，但不是高通 量的办法。 35.结构基因组学研究的主要内容是( ) A.实验研究基因功能 B.基因组DNA序列测定 C.描述基因表达模式 D.比较不同物种的基因组 E.搜索序列同源的基因 参考答案：B 【解析】 36.质谱技术常用于下列哪项研究( ) A.基因组学 B.RNA组学 C.转录组学 D.蛋白质组学 E.比较基因组学 参考答案：D 【解析】 37.用正常的基因通过体内基因同源重组，原位替换致病基因，完全恢复正常基因功能的基因治疗方法是( ) A.基因置换 B.基因失活 C.基因增补 D.基因矫正 E.基因沉默 参考答案：A 【解析】 8 38.下列不属于基因治疗的方法是( ) A.基因矫正 B.基因置换 C.基因失活 D.基因增补 E.基因敲除 参考答案：E 【解析】考点，基因治疗的策略。常用的基因治疗策略有基因矫正、基因置换、基因增补、基因沉默或 失活等。 39.目前基因治疗不允许作为靶细胞的是( ) A.淋巴细胞 B.肿瘤细胞 C.生殖细胞 D.肝细胞 E.造血细胞 参考答案：C 【解析】考点，基因治疗靶细胞的选择。基因治疗通常采用体细胞，生殖细胞的基因治疗目前只允许用 于动物实验。 40.目前用于高通量鉴定蛋白质的主要技术是( ) A.双向电泳(2-DE) B.酵母双杂交 C.串联质谱(MS/MS) D.细胞培养物中氨基酸的稳定同位素标记技术 E.多维高效液相 参考答案：C 【解析】考点，蛋白质组学研究常规技术。2-DE是蛋白质组学分离蛋白质的经典技术，酵母双杂交用于 研究蛋白质相互作用，氨基酸的稳定同位素标记为蛋白质体内标记技术。多维高效液相是蛋白质组学分离肽 段的主要技术。 41.盐析法沉淀蛋白质的原理是( ) A.改变蛋白质的一级结构 B.使蛋白质变性 C.使蛋白质的等电点发生改变 D.中和蛋白质表面电荷并破坏水化膜 E.改变蛋白质的空间结构，降低其溶解度 参考答案：D 【解析】考点，盐析原理。高浓度中性盐破坏蛋白质胶体稳定性的2个因素：破坏水化膜、中和电荷层。 优点：盐析沉淀的蛋白质不变性。 42.用凝胶过滤层析柱分离蛋白质时，下列正确的是( ) A.分子体积最大的蛋白质最先洗脱下来 B.分子体积最小的蛋白质最先洗脱下来 C.不带电荷的蛋白质最先洗脱下来 D.带电荷的蛋白质最先洗脱下来 9 E.没有被吸附的蛋白质最先洗脱下来 参考答案：A 【解析】考点，凝胶过滤层析。凝胶过滤层析是根据分子体积的大小分离的手段，与分子是否带电荷或 被吸附关系不大。层析柱内填满带有小孔的颗粒，蛋白质溶液加于柱之顶部，任其往下渗漏，小分子蛋白质 进入孔内，因而在柱中滞留时间较长，大分子蛋白质不能进入孔内而径直流出，因此不同大小的蛋白质得以 分离。分子大的蛋白质先被洗脱下来。马肝过氧化氢酶(相对分子质量247500)分子量最大，体积最大，所以 最先被洗脱。胰岛素(相对分子质量5733)分子量最小，体积最小，所以最后被洗脱。 43.下列哪种疾病相关基因鉴定是定位克隆的成功例证( ) A.假肥大型肌营养不良 B.肥胖 C.视网膜母细胞瘤 D.着色干皮病 E.高血压 参考答案：A 【解析】 44.在基因治疗中常选用的基因载体是( ) A.逆转录病毒 B.DNA病毒 C.质粒 D.噬菌体 E.脂质体 参考答案：A 【解析】考点，基因治疗载体的选择。基因治疗常用的病毒载体有逆转录病毒、腺病毒等。 45.目前在转基因小鼠中常用的基因敲除技术是根据什么原理设计的( ) A.反义核苷酸的抑制作用 B.转座成分的致突变作用 C.离体定向诱变 D.同源重组 E.核酸杂交 参考答案：D 【解析】 46.下列不属于功能基因组学研究内容的是( ) A.蛋白质组学 B.鉴定(注释)基因 C.转录组学 D.描述基因表达模式 E.分析基因序列之间的差异与相似性 参考答案：E 47.PCR产物具有特异性，是因为( ) A.TaqDNA聚合酶保证了产物的特异性 B.适合的变性、退火、延伸温度 10 C.选择特异性的引物 D. E.取材适当 参考答案：C 【解析】考点，PCR原理。PCR反应的特异性由引物的特异性决定，它特异地扩增位于2个引物间的DNA片 段。 48.重组DNA技术里的分子克隆是指( ) A.细菌克隆 B.DNA克隆 C.RNA克隆 D.动物克隆 E.植物克隆 参考答案：B 【解析】考点，分子克隆的定义。DNA克隆即分子克隆，应用酶学的方法，在体外将各种来源的遗传物质 DNA与载体DNA结合成具有自我复制能力的DNA分子，继而通过转化或转染宿主细胞，筛选出含有目的基因的转 化子细胞，再进行扩增，提取获得大量同一DNA分子。 49.在已知部分序列的情况下，获得目的DNA最常用的方法是( ) A.化学合成法 B.聚合酶链式反应 C.筛选cDNA文库 D.筛选基因组文库 E.DNA合成仪合成 参考答案：B 【解析】 50.Sanger双脱氧法测序时，为了获得鸟苷酸残基为末端的一组大小不同的片段，应该选择哪种物质( ) A.ddTTP B.ddCTP C.ddGTP D.ddATP E.ddUTP 参考答案：C 【解析】考点，Sanger双脱氧法测序。利用DNA合成过程中加入荧光标记的ddNTP，使DNA链合成终止。 51.下列关于基因置换治疗策略的叙述，正确的是( ) A.为了抑制有害基因表达 B.为了添加新的基因 C.利用同源重组技术 D.置换后缺陷基因还存在 E.导致DNA断裂 参考答案：C 【解析】考点，基因置换的定义。用正常基因通过体内基因同源重组，原位替换致病基因。 11 52.基因诊断的目标分子不可以是( ) A.DNA B.基因的表达产物 C.RNA D.脂多糖 E.mRNA 参考答案：D 【解析】考点，基因诊断的定义。基因诊断检测的目标分子是DNA、RNA或蛋白质，不包括脂多糖。 53.基因芯片是建立在哪种技术的基础之上( ) A.核酸分子杂交 B.ChIP C.蛋白质印迹 D.EMSA E.实时PCR 参考答案：A 【解析】考点，基因芯片。基因芯片是以许多特定的DNA片段有规律地紧密排列固定于单位面积的支持物 上，然后与荧光标记样品进行杂交进行检测、比较和分析，从而获得样品中基因的信息。 54.醋酸纤维素薄膜电泳可把血清蛋白分成5条带，由正极数起它们的顺序为( ) A. B. C. D. E. 参考答案：D 【解析】 55.下列可能是Ⅱ类限制酶的识别序列是( ) A.ATATCG B.CCCTGG C.GATATC D.AGCCGA 12 E.GAGTC 参考答案：C 【解析】 56.下列关于逆转录PCR的叙述，正确的是( ) A.需要先进行PCR，再进行逆转录 B.该反应的最初是模板不是DNA C.合成的终产物是基因组DNA D.在进行PCR时，模板不是cDNA E.逆转录合成的产物是RNA 参考答案：B 【解析】考点，逆转录PCR。逆转录PCR是以RNA为模板，在逆转录酶的作用下合成cDNA，再以cDNA为模板 通过PCR反应来扩增目的基因的技术。 57.用于检测体内蛋白质-DNA相互作用的技术是( ) A.酵母双杂交实验 B.电泳迁移率变动测定(EMSA) C.GSTpull-down实验 D.染色质免疫沉淀(ChIP) E.免疫沉淀(CoIP) 参考答案：D 【解析】考点，蛋白质和DNA相互作用技术。染色质免疫沉淀ChIP是在活细胞状态下，用化学交联试剂固 定蛋白质-DNA复合物，并将其随机切断为一定长度范围内的